用于靶向递送siRNA的组合物
2020-01-11

用于靶向递送siRNA的组合物

本发明涉及体内靶向递送RNA干扰(RNAi)多核苷酸到肝细胞的组合物。靶向的RNAi多核苷酸与共靶向的递送聚合物一起给予。递送聚合物提供膜渗透功能以将RNAi多核苷酸从细胞外移到细胞内。可逆修饰提供对所述递送聚合物的生理响应。

对蛋白%

将药物可接受载体或稀释剂内的RNAi多核苷酸偶联物和递送聚合物给予哺乳动物。在一个实施方式中,所述递送聚合物和RNAi多核苷酸偶联物在给予所述哺乳动物前可在溶液中合并。在另一实施方式中,所述递送聚合物和所述RNAi多核苷酸偶联物可在单独的溶液中共给予所述哺乳动物。在另一实施方式中,所述递送聚合物和所述RNAi多核苷酸偶联物可依次给予所述哺乳动物。对于依次给予,所述递送聚合物可在给予所述RNAi多核苷酸偶联物之前给予。或者,对于依次给予,所述RNAi多核苷酸偶联物可在给予所述递送聚合物之前给予。

其中Rl包括ASGPr靶向配体或位阻稳定剂(例如PEG)。

CDM-NAG或CDM-PEG与多胺的反应产生:

在另一实施方式中,所述多核苷酸靶向部分包含半乳糖簇(半乳糖簇靶向部分)。如本文所用,半乳糖簇包含具有2-4种末端半乳糖衍生物的分子。如本文所用,术语半乳糖衍生物包括半乳糖和对去唾液酸糖蛋白受体的亲和性等于或超过半乳糖的半乳糖衍生物。末端半乳糖衍生物通过其C-I碳连接分子。去唾液酸糖蛋白受体(ASGPr)对肝细胞独特并结合分支的半乳糖末端糖蛋白。优选的半乳糖簇具有各自对去唾液酸糖蛋白受体具有亲和性的3种末端半乳糖胺或半乳糖胺衍生物。更优选的半乳糖簇具有3种末端N-乙酰-半乳糖胺。本领域其他常见术语包括三触角型(tri-antennary)半乳糖、三价半乳糖和半乳糖三聚体。已知三触角型半乳糖衍生物簇结合ASGPr的亲和性大于二触角型或单触角型半乳糖衍生物结构(Baenziger和Fiete,1980,Cell,22,611-620;Connolly等,1982,J.Biol.Chem.,257,939-945)。和性需要多价以获得nM的和性。与递送聚合物共给予时,结合对去唾液酸糖蛋白受体具有亲和性的单半乳糖衍生物不能将RNAi多核苷酸功能性体内递送到肝细胞中。

Rozema等在美国专利公开20040162260中证明了膜活化多胺可逆调控膜破坏活性的方式。所述膜活化多胺提供了破坏细胞膜的方法。PH依赖性可逆调控提供将活性限制在靶细胞内涵体中的方法,以此限制毒性。其方法依赖于含2-丙酸-3-甲基马来酸酐的多胺上的胺修饰。

用格兰研究公司(GlenResearch,美国维吉尼亚州)的5’-羧基-改性剂ClO酰胺制备5/-ClO-NHS酯修饰的有义链(NHSClO)GGAUfCfAUfCfUfCfAA⑶fC-fUfUfACfdTsdT(SEQID3)。仍结合固体支持物的活化RNA用于偶联下表所列的亲脂胺。Cf和Uf是相应碱基的2/_氟核苷酸,s是硫代磷酸酯连接。

小写字母=2/-O-CH3取代

在另一实施方式中,用具有至少三种不同单体物质的聚合物作为递送聚合物。对于本发明的三元共聚物,所述三种单体物质最少由下述组成:含伯胺或仲胺侧基的单体、含第一疏水侧基的单体和含第二疏水侧基的单体,其中所述第一和第二疏水侧基不同。在更优选的实施方式中,所述三种或更多单体物质最少由下述组成:含伯胺或仲胺侧基的单体、含低疏水性侧基的单体和含中等或高疏水性侧基的单体。